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更多精彩,请点击上方蓝字关注我们!使用Zenix-C SEC-300体积排阻色谱柱可实现抗体药物偶联物(Antibody Drug Conjugate,以下简称ADC)的聚合体、单体和片段分析,并可作为ADC批次释放和稳定性分析的一部分。
结合反应后的游离小分子药物分析可使用Zenix-C SEC-80体积排阻色谱柱(赛分SEC产品线中的最小孔径为80?)完成。
ADC的电荷异质体可使用Proteomix SCX阳离子交换色谱柱进行分析和分离收集,以进一步表征。
ADC的药物抗体比(DAR)分析可使用Proteomix HIC Butyl疏水作用色谱柱在自然条件下进行,也可使用Proteomix RP-1000反相色谱柱进行在线质谱测定。
本文以应用图谱的形式介绍赛分科技的上述产品如何为ADC的分离提供组合式解决方案。
单克隆抗体和ADC的体积排阻分析
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表面化学差异
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Zenix色谱柱是分析单克隆抗体的理想选择
适用于各种非疏水性蛋白质,包括单克隆抗体等
Zenix-C色谱柱是分析ADC的理想选择
适用于ADC,衍生化单克隆抗体,PEG修饰的蛋白,膜蛋白,“超粘蛋白”等
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Zenix-C SEC-300色谱柱对曲妥珠单抗(赫赛汀)的分析
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Zenix-C SEC-300色谱柱对赫赛汀赖氨酸ADC的分析
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对赫赛汀赖氨酸ADC的分析——Zenix-C SEC-300色谱柱与东曹TSKgel G3000SWXL色谱柱的对比
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Zenix-C SEC-300色谱柱对赫赛汀赖氨酸ADC的分析——不同缓冲盐
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Zenix-C SEC-300色谱柱对赫赛汀赖氨酸ADC的分析——有机改性剂
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半胱氨酸ADC分析——SEC-300色谱柱的固定相比较
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Zenix-C SEC-300色谱柱对半胱氨酸ADC的分析——不同流动相
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采用10%乙腈和200 mM NaClO4,提高了单体峰的总蛋白回收率、分辨率和拖尾因子。
ADC电荷异质体分离的离子交换方法
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赫赛汀半胱氨酸ADC1(以可切割连接物链接)——HEPES缓冲液
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赫赛汀半胱氨酸ADC2(以不可切割连接物链接)——HEPES缓冲液
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ADC与游离药物分析
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Zenix-C SEC-80色谱柱对ADC和游离药物紫杉醇(Paclitaxel)的分析
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Proteomix RP反相色谱柱对完整和还原的单抗/ADC以及单抗片段的分离
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Proteomix RP反相色谱柱对赫赛汀及其ADC的分离
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Proteomix RP反相色谱柱对赫赛汀及其赖氨酸ADC的分离
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单抗/ADC片段:还原的赫赛汀及其半胱氨酸ADC1
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mAb321的分离
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温度效应: 单抗在25°C/40°C/80°C条件下的分离
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最小样品残留
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Proteomix HIC Butyl疏水作用色谱柱对ADC的分离
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Proteomix HIC疏水作用色谱柱对赫赛汀及其ADC的分离
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赫赛汀半胱氨酸ADC的分离: Proteomix HIC Butyl-NP5疏水作用色谱柱与TSKgel butyl-NPR柱的比较
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声明:Tskgel是TOSOH(东曹)公司的注册商标;该分离效果的比较不能代表所有应用场景。
Proteomix HIC Butyl-NP5疏水作用色谱柱对赫赛汀赖氨酸ADC的分离——三批次填料的批间重现性测试
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结论:
由于结合的药物小分子具有疏水性,与传统树脂表面有次级相互作用,因此对于ADC来说,Zenix-C 300A体积排阻固定相具有更好的回收率和分离度。
不同的流动相添加剂,如有机物、离液剂等,能够对应提高不同的ADC样品回收率和分离度。
Zenix-C 80?体积排阻固定相具有较小的孔径,有利于游离药物的分析,这与挥发性流动相质谱法一致。
Proteomix SCX色谱柱可应用于ADC电荷异质体研究。结合态和游离态的单抗能够根据蛋白质表面电荷的不同而得到分离。需要对单个峰的收分进行进一步的表征,以确定这些电荷异质体的性质。
Proteomix RP-1000反相色谱固定相能够以最小样品残留成功分离ADC,也为样品的在线质谱测定提供了理想的色谱分析方法。
Proteomix HIC Butyl疏水作用色谱柱可以在自然条件下成功分析完整ADC的药物连接种类分布和平均药物抗体比(DAR)测定。
订购信息
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更多的孔径、粒度和柱尺寸规格可根据要求提供
关于赛分科技
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赛分科技有限公司(Sepax Technologies, Inc)于2002年在美国特拉华州高新技术开发区成立,致力于开发和生产用于药物及生物大分子分离纯化的液相色谱材料和技术。历经十七年的辛勤耕耘,赛分科技已发展成为一个集研发,生产和全球销售为一体的实业型企业。公司主要产品为液相色谱纯化介质、分析检测液相色谱柱及耗材和医疗诊断色谱柱及试剂。在制药下游的纯化工艺领域,为客户提供色谱纯化介质、工艺开发、仪器设备系统的整体解决方案。
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